羊前体蛋白（Thrombosis Precursor Protein，TpP）ELISA试剂盒是一种基于酶联免疫吸附测定技术（ELISA）的实验室检测产品，用于体外定量分析样本中羊源前体蛋白的含量。该试剂盒适用于蛋白表达水平研究、动物凝集反应相关机制探讨以及相关基础科研实验。

检测原理

该试剂盒采用经典的夹心法ELISA原理进行设计。其主要步骤包括：

1. 抗体包被：微孔板表面预先包被有高亲和力的羊TpP特异性抗体；

2. 样本反应：样本中的前体蛋白与固相抗体结合；

3. 检测抗体结合：加入酶标记的检测抗体，与目标蛋白形成“抗体-抗原-抗体”三元复合物；

4. 显色反应：添加TMB底物，在酶催化下显色；

5. 终止反应与读数：反应终止后，通过酶标仪在450 nm波长下读取吸光值，OD值与TpP含量成正比。

试剂盒组成

一个标准的羊TpP ELISA试剂盒通常包括以下主要组分：

• 包被有抗TpP抗体的96孔酶标板

• TpP标准品（已知浓度的参考物）

• HRP标记的检测抗体

• 稀释液和洗涤缓冲液

• 显色底物（如TMB）

• 反应终止液

• 说明书及标准曲线模板

操作流程简述

1. 将样本和标准品加入微孔板中；

2. 室温或恒温孵育一定时间，促使抗原抗体结合；

3. 洗板，去除未结合物质；

4. 加入酶标抗体，继续孵育；

5. 洗板后加入显色底物，反应显色；

6. 加入终止液，使用酶标仪读取450 nm吸光度；

7. 根据标准曲线计算样本中TpP浓度。

适用样本类型

• 羊血清

• 羊血浆

• 组织匀浆

• 细胞培养上清液等液体样品

储存与稳定性

• 所有组分应在2–8°C下避光保存；

• 显色底物需避免阳光直射，防止提前反应；

• 所有液体试剂应避免反复冻融；

• 包被板应避免受潮，开封后建议尽快使用。

注意事项

• 使用前应将所有试剂平衡至室温；

• 实验操作需保持一致性，以减少批次误差；

• 所有实验耗材建议使用无热原、无污染处理；

• 洗板需 ，防止残留影响吸光值；

• 建议进行样本平行检测，提升结果可靠性。