一、试剂盒概述

羊磷酸化细胞外信号调节激酶（pERK）ELISA试剂盒是一种用于定量检测羊血清、血浆或细胞培养液中pERK蛋白水平的免疫学分析工具。该试剂盒基于酶联免疫吸附（ELISA）技术，通过抗原-抗体特异性结合实现pERK的高灵敏度检测，适用于细胞信号通路研究及相关实验室科研分析。

二、原理与检测机制

该ELISA试剂盒通常采用**夹心法（Sandwich ELISA）**原理：

捕获抗体固定化：在微孔板上预包被特异性抗体，专门识别pERK蛋白；

样品加样：待测样品中的pERK与捕获抗体结合形成复合物；

检测抗体结合：加入酶标记的 抗体，与已结合的pERK结合形成夹心复合物；

底物显色：加入底物液，酶促反应生成可测量颜色信号；

定量分析：通过光密度（OD值）与标准曲线对比，计算样品中pERK浓度。

该方法特异性强，可准确检测样品中磷酸化形式的ERK蛋白水平。

三、试剂盒组成

试剂盒一般包括以下组件：

预包被微孔板：含捕获抗体的96孔板；

标准品：梯度浓度的pERK标准溶液，用于建立标准曲线；

酶标二抗：用于与pERK结合形成复合物；

洗涤液：去除非特异性结合；

底物液与终止液：用于显色反应及终止反应；

样品稀释液：确保样品浓度适合检测范围。

四、检测流程

样品准备：血清、血浆或细胞培养上清液可直接或适当稀释后使用；

加样孵育：将样品加入微孔板，与捕获抗体结合；

洗涤：去除未结合物质，降低背景干扰；

加酶标二抗：与目标蛋白形成夹心复合物；

底物显色：进行酶促显色反应，生成可测量颜色；

终止反应与测定：使用酶标仪测定光密度；

数据分析：依据标准曲线换算样品中pERK浓度。

五、技术特点

高特异性：特异性识别磷酸化形式的ERK蛋白；

高灵敏度：可检测低浓度pERK；

操作简便：标准ELISA流程，易于实验室操作；

适用样品广：血清、血浆及细胞培养上清液均可检测；

重复性好：标准化生产保证实验结果稳定可靠。

六、应用方向

细胞信号通路研究及磷酸化蛋白水平检测；

羊血液及细胞样品中pERK水平定量分析；

相关科研实验中对细胞激酶活化状态的研究与分析